小鼠骨髓多染红细胞微核实验

小鼠骨髓多染红细胞微核实验

本实验原理为：

细胞分裂过程中在染色体断裂剂或纺锤体毒物作用下，细胞染色体

断裂产生不含着丝粒的断片，或者整条染色体遗失在细胞质中，形

成微核。

染色与主核一致，大小相当于细胞直径的1/20-1/5，圆形或椭圆

形，一个或多个。

在多种细胞中出现。

在红细胞成熟前组后一次分裂后数小时主核排除而微核保留。

红细胞发育过程：

骨髓多能干细胞→定向干细胞→原红细胞→早幼红细胞→中幼红细

胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红细胞

从原红细胞到晚幼红细胞需分裂3-4次。形成晚幼红细胞后即不再

分裂，在发育过程中主核排出形成网织红细胞。网织红细胞含有少

量RNA，甲酚蓝染色成蓝色丝网状。网织红细胞进一步发育，RNA消

失成为成熟红细胞。

注：Giemsa染色时网织红细胞呈蓝灰色，称为多染红细胞；而成熟红细

胞染色呈橘红色，称为正染红细胞。

1.染毒：昆明种小鼠，环磷酰胺100mg/kg腹腔注射。

2.骨髓液制备和涂片：颈椎脱臼处死动物。解剖后取胸骨或股骨，去除肌肉，剪去骨骺，将骨髓挤出或冲洗出，滴于载玻片推片。

3.固定：晾干后甲醇固定15秒，取出晾干。

4.染色：晾干后以新鲜配制的Giemsa染液染色5-10分钟，自来水冲洗，晾干。

5.观察计数：低倍镜选择分布均匀、染色较好的区域，油镜下观察计数。含有微核的PCE/1000个PCE；PCE/NCE。

1.PCE/NCE比值约为1（0.6-1.2）。比值小于0.1表明PCE生成严重受抑制，染毒剂量过大。

2.用统计方法分析结果。